SZDB/Z 131-2015《非洲猪瘟病毒抗体检测 阻断酶联免疫吸附法》

SZDB/Z 131-2015《非洲猪瘟病毒抗体检测 阻断酶联免疫吸附法》基本信息

标准号：SZDB/Z 131-2015

中文名称：《非洲猪瘟病毒抗体检测 阻断酶联免疫吸附法》

发布日期：2015-02-27    

实施日期：2015-03-01

发布部门：深圳市市场监督管理局    

提出单位：深圳市检验检疫科学研究院    

起草单位：深圳市检验检疫科学研究院、深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心

起草人：曹琛福、花群义、吕建强、杨俊兴、宗卉、林庆燕、阮周曦、张彩虹、刘建利、孙洁、陶虹、廖立珊、唐金明、陈书琨、叶奕优、黄超华    

中国标准分类号：B41动物检疫、兽医与疫病防治

国际标准分类号：11.220兽医学

SZDB/Z 131-2015《非洲猪瘟病毒抗体检测 阻断酶联免疫吸附法》介绍

深圳市市场监督管理局于2015年2月27日发布了《非洲猪瘟病毒抗体检测 阻断酶联免疫吸附法》（以下简称“本标准”），并于同年3月1日正式实施。

一、标准概述

本标准（SZDB/Z 131-2015）规定了非洲猪瘟病毒抗体检测的阻断酶联免疫吸附法（ELISA）的具体操作步骤、所需试剂、设备和质量控制措施。

二、检测方法

1、原理

阻断ELISA是一种基于抗体与抗原结合的原理，通过检测抗体与抗原之间的反应来确定样品中是否存在非洲猪瘟病毒的抗体。在这种方法中，如果样品中含有抗体，它会与抗原结合，阻止了酶标记的抗体与抗原的结合，从而减少酶的活性，通过测量酶的活性变化来判断样品中抗体的存在。

2、操作步骤

样品准备：收集猪只的血液样品，并进行适当处理。

试剂准备：包括抗原、抗体、酶标记物和其他必要的缓冲液。

加样：将处理好的样品和试剂加入到ELISA板中。

孵育：让样品和试剂在一定条件下反应。

洗涤：去除未结合的试剂，以便准确测量。

显色：加入底物，使酶催化反应产生颜色变化。

终止：加入终止液，停止反应。

读取：使用ELISA阅读器读取颜色变化，转换成数值。

3、质量控制

为了确保检测结果的准确性，本标准还规定了质量控制措施，包括：

试剂质量：确保所有试剂均符合质量标准。

操作人员培训：确保操作人员经过专业培训，熟悉操作流程。

设备校准：定期校准ELISA阅读器和其他相关设备。

结果验证：通过使用已知阳性和阴性对照样品来验证检测结果的准确性。

三、试剂与设备

1、抗原：非洲猪瘟病毒的特定抗原。

2、抗体：特异性抗体，用于与抗原结合。

3、酶标记物：与抗体结合的酶，用于催化显色反应。

4、缓冲液：用于稀释样品和试剂。

5、ELISA板：用于容纳样品和试剂。

6、ELISA阅读器：用于读取颜色变化并转换成数值。

四、结果解释

检测结果通常以OD（光学密度）值表示，通过与标准曲线比较来确定样品中抗体的存在与否。OD值高于某个设定的阈值通常被认为是阳性，即样品中含有非洲猪瘟病毒抗体。

SZDB/Z 131-2015《非洲猪瘟病毒抗体检测 阻断酶联免疫吸附法》为非洲猪瘟病毒抗体的检测提供了一个标准化的方法。通过遵循本标准规定的操作步骤和质量控制措施，可以确保检测结果的准确性和可靠性，从而为非洲猪瘟的防控提供科学依据。