WS/T 66-1996《全血胆碱酯酶活性的分光光度测定方法 羟胺三氯化铁法》

WS/T 66-1996《全血胆碱酯酶活性的分光光度测定方法  羟胺三氯化铁法》基本信息

标准号：WS/T 66-1996

中文名称：《全血胆碱酯酶活性的分光光度测定方法  羟胺三氯化铁法》

发布日期：1996-10-14    

实施日期：1997-05-01

发布部门：中华人民共和国卫生部    

提出单位：卫生部卫生监督司    

归口单位：中国预防医学科学院劳动卫生与职业病研究所    

起草单位：辽宁省劳动卫生研究所

起草人：周健英、胡素清    

中国标准分类号：C04基础标准与通用方法

WS/T 66-1996《全血胆碱酯酶活性的分光光度测定方法  羟胺三氯化铁法》介绍

WS/T 66-1996《全血胆碱酯酶活性的分光光度测定方法 羟胺三氯化铁法》是由中华人民共和国卫生部发布的一项国家卫生标准，于1996年10月14日发布，自1997年5月1日起实施。

一、标准背景

胆碱酯酶是一类重要的酶，广泛存在于生物体内，主要包括乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶。胆碱酯酶活性的测定在临床诊断、药物监测、毒物检测等领域具有重要意义。羟胺三氯化铁法是一种常用的胆碱酯酶活性测定方法，具有操作简便、灵敏度高、重复性好等优点。

二、标准适用范围

WS/T 66-1996标准适用于测定人全血中胆碱酯酶活性。该方法可用于临床检验、药物研究、毒物检测等多种场合。

三、测定原理

羟胺三氯化铁法测定全血胆碱酯酶活性的原理是：在酸性条件下，胆碱酯酶催化底物乙酰硫代胆碱与羟胺反应，生成乙酰羟胺。乙酰羟胺与三氯化铁反应，生成红色络合物。通过测定红色络合物的吸光度，可以计算出胆碱酯酶的活性。

四、仪器与试剂

仪器

1、分光光度计

2、恒温水浴

3、离心机

试剂

1、底物溶液：0.01 mol/L 乙酰硫代胆碱溶液

2、显色剂：0.02 mol/L 羟胺溶液

3、染色剂：0.1 mol/L 三氯化铁溶液

4、缓冲液：pH 6.0 的磷酸盐缓冲液

5、标准品：胆碱酯酶标准品

五、操作步骤

1、取新鲜的抗凝血，离心分离出血清。

2、取血清适量，加入底物溶液，37℃水浴预孵育10分钟。

3、加入显色剂，37℃水浴反应10分钟。

4、加入染色剂，室温下显色10分钟。

5、用分光光度计测定吸光度，波长为530 nm。

六、结果计算

根据标准曲线，计算出样品的胆碱酯酶活性。胆碱酯酶活性的单位为国际单位（IU/L）。

七、注意事项

1、操作过程中应避免污染，确保试剂的纯度。

2、显色剂和染色剂的加入顺序和时间应严格按照标准操作。

3、测定吸光度时，应使用空白对照校正。

WS/T 66-1996《全血胆碱酯酶活性的分光光度测定方法 羟胺三氯化铁法》是一项重要的国家卫生标准，为胆碱酯酶活性的测定提供了一种简便、准确的方法。