GB/T 40254-2021《轮枝菌属实时荧光PCR检疫鉴定方法》

GB/T 40254-2021《轮枝菌属实时荧光PCR检疫鉴定方法》基本信息

标准号：GB/T 40254-2021

中文名称：《轮枝菌属实时荧光PCR检疫鉴定方法》

发布日期：2021-05-21

实施日期：2021-12-01

发布部门：国家市场监督管理总局  国家标准化管理委员会

提出单位：全国植物检疫标准化技术委员会(SAC/TC 271)

归口单位：全国植物检疫标准化技术委员会(SAC/TC 271)

起草单位：中华人民共和国宁波海关、中国科学院微生物研究所、西宁市蔬菜技术服务中心、中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国乌鲁木齐海关

起草人：段维军、蔡磊、张慧丽、赵鹏、张晓梅、郭立新、刘芳、李雪莲、张永江、张小菊、陈先锋

中国标准分类号：B16植物检疫、病虫害防治

国际标准分类号：65.020.01农业和林业综合

GB/T 40254-2021《轮枝菌属实时荧光PCR检疫鉴定方法》介绍

国家市场监督管理总局、国家标准化管理委员会于2021年5月21日发布了《轮枝菌属实时荧光PCR检疫鉴定方法》（GB/T 40254-2021），并于2021年12月1日起正式实施。

一、标准概述

GB/T 40254-2021标准规定了一种基于实时荧光PCR技术的轮枝菌属检疫鉴定方法。该方法具有高灵敏度、高特异性、操作简便、结果快速等优点，适用于轮枝菌属的快速检测和鉴定。

二、标准主要内容

1、术语和定义

标准首先对轮枝菌属、实时荧光PCR等关键术语进行了明确的定义。

2、原理

标准明确了实时荧光PCR技术的原理，即利用特异性引物和荧光探针，通过监测PCR扩增过程中荧光信号的变化来定量检测目标DNA。

3、试剂和材料

标准详细列出了进行轮枝菌属实时荧光PCR检疫鉴定所需的试剂和材料，包括DNA提取试剂、PCR反应体系、阳性对照、阴性对照等。

4、仪器设备

标准规定了进行实时荧光PCR检测所需的仪器设备，如PCR仪、离心机、超净工作台等，并对其性能和参数提出了具体要求。

5、样品采集和处理

标准对轮枝菌属样品的采集、保存和处理方法进行了详细规定，确保样品的质量和检测结果的准确性。

6、DNA提取

标准明确了DNA提取的方法和步骤，包括样品的破碎、DNA的提取、纯化和定量等环节。

7、实时荧光PCR检测

标准详细描述了实时荧光PCR检测的实验流程，包括PCR反应体系的配制、PCR扩增程序的设置、数据分析等。

8、结果判定

标准对阳性、阴性和灰区结果的判定标准进行了明确，为实验结果的准确判断提供了依据。

9、方法验证

标准对方法的特异性、灵敏度、重复性和稳定性等进行了验证，确保方法的可靠性和有效性。

三、标准的意义和应用

GB/T 40254-2021标准的发布和实施，对于提高轮枝菌属检疫鉴定的效率和准确性具有重要意义。该标准为相关部门提供了一种科学、规范的检测方法，有助于及时发现和控制轮枝菌属的传播，保障农业生产和生态环境的安全。