




亚硝酸根是一种常见的环境污染物,主要来源于工业排放、农业肥料使用和自然过程。亚硝酸根测定是检测样品中亚硝酸根离子含量的过程,常用于食品、水质、环境样品等检测。以下是几种常用的亚硝酸根测定方法。
一、分光光度法
分光光度法是一种基于亚硝酸根与特定试剂反应后产生有色化合物的方法。这种方法简单、快速,适用于实验室和现场检测。
1、格里斯试剂法
格里斯试剂法是一种经典的分光光度法,通过将亚硝酸根与格里斯试剂(磺胺酸和N-(1-萘基)-乙二胺二盐酸盐)反应生成紫红色络合物,其吸光度与亚硝酸根浓度成正比。测定步骤如下:
取一定体积的水样,加入格里斯试剂。
在538nm波长下测定吸光度。
根据标准曲线计算亚硝酸根浓度。
2、紫外分光光度法
紫外分光光度法利用亚硝酸根在紫外光下的吸收特性进行测定。这种方法不需要添加试剂,减少了试剂干扰和操作步骤。
取水样,直接测定在特定波长下的吸光度。
根据标准曲线计算亚硝酸根浓度。
二、离子色谱法
离子色谱法是一种高效、灵敏的分离和检测离子的方法。通过使用离子交换柱和适当的洗脱液,可以分离并测定亚硝酸根。
操作步骤:
将水样通过离子交换柱;
选择合适的洗脱液,如碳酸钠溶液;
通过电导检测器测定亚硝酸根的峰面积;
根据标准曲线计算亚硝酸根浓度。
三、化学发光法
化学发光法是一种高灵敏度的检测方法,通过亚硝酸根与发光试剂反应产生的光信号进行测定。
操作步骤:
将水样与发光试剂(如鲁米诺)混合;
在碱性条件下,亚硝酸根与发光试剂反应产生光信号;
通过光电倍增管检测光信号强度;
根据标准曲线计算亚硝酸根浓度。
四、电化学方法
电化学方法通过测量亚硝酸根在电极上的氧化还原电流来测定其浓度。
操作步骤:
将水样引入含有工作电极、参比电极和辅助电极的电化学池中;
施加适当的电位,使亚硝酸根在工作电极上发生氧化或还原反应;
测量产生的电流信号;
根据标准曲线计算亚硝酸根浓度。
五、酶联免疫吸附测定
ELISA是一种基于抗原-抗体反应的生物检测方法,可以用于亚硝酸根的快速检测。
操作步骤:
将特异性抗体固定在固相载体上;
将水样与酶标记的亚硝酸根模拟物混合;
混合物与固相抗体反应,形成抗原-抗体-酶复合物;
加入底物,酶催化底物产生颜色变化;
通过分光光度计测定颜色变化,计算亚硝酸根浓度。
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