SN/T 1165.1-2002《蓝舌病竞争酶联免疫吸附试验操作规程》

SN/T 1165.1-2002《蓝舌病竞争酶联免疫吸附试验操作规程》基本信息

标准号：SN/T 1165.1-2002

中文名称：《蓝舌病竞争酶联免疫吸附试验操作规程》

发布日期：2002-11-25    

实施日期：2003-05-01

发布部门：中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局    

起草单位：国家认证认可监督管理委员会

中国标准分类号：B41动物检疫、兽医与疫病防治

SN/T 1165.1-2002《蓝舌病竞争酶联免疫吸附试验操作规程》介绍

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局于2002年11月25日发布了《蓝舌病竞争酶联免疫吸附试验操作规程》（SN/T 1165.1-2002），并于2003年5月1日正式实施。

一、标准概述

SN/T 1165.1-2002标准规定了蓝舌病竞争酶联免疫吸附试验（cELISA）的操作规程。cELISA技术基于特异性抗体与病毒抗原之间的特异性结合原理，通过酶标记的二抗与竞争性抗体的结合，实现对病毒抗原的定性和定量检测。

二、标准适用范围

本标准适用于蓝舌病病毒的检测，包括病毒抗原的定性检测和病毒抗体的定量检测。标准适用于以下几类样本的检测：

1、反刍动物的血液样本；

2、反刍动物的组织样本；

3、反刍动物的乳汁样本；

4、蓝舌病病毒感染的细胞培养物。

三、试剂与材料

1、竞争性抗体：针对蓝舌病病毒的特异性单克隆抗体；

2、酶标记的二抗：针对竞争性抗体的酶标记多克隆抗体；

3、病毒抗原：蓝舌病病毒的纯化抗原或感染细胞培养物；

4、酶底物：用于检测酶活性的底物；

5、缓冲液：用于稀释样本、抗体和抗原的缓冲液；

6、洗涤液：用于清洗反应板的洗涤液；

7、显色剂：用于显色反应的试剂。

四、操作步骤

1、样本准备：对血液、组织、乳汁等样本进行处理，提取病毒抗原或抗体；

2、反应板包被：将病毒抗原固定在反应板的孔中；

3、样本稀释：将提取的样本进行适当稀释；

4、竞争反应：将稀释后的样本与竞争性抗体混合，加入反应板中进行竞争反应；

5、洗涤：去除未结合的样本和竞争性抗体；

6、二抗标记：加入酶标记的二抗，与竞争性抗体结合；

7、显色：加入酶底物和显色剂，进行显色反应；

8、测定：使用酶标仪测定各孔的吸光度值。

五、结果判断与报告

1、结果判断：根据吸光度值与标准曲线的关系，判断样本中病毒抗原或抗体的存在与否；

2、结果报告：将检测结果以书面形式报告给委托方或相关部门。

六、质量控制

为确保cELISA试验的准确性和可靠性，标准对质量控制提出了以下要求：

1、使用标准化的试剂和材料；

2、定期对试验操作进行验证和校准；

3、对试验结果进行统计分析，评估试验的重复性和准确性。

SN/T 1165.1-2002《蓝舌病竞争酶联免疫吸附试验操作规程》为蓝舌病的检测提供了一种准确、快速、简便的方法。通过遵循这一标准，实验室可以有效地提高蓝舌病检测的准确性和效率。标准也为相关研究人员提供了宝贵的参考，有助于推动蓝舌病研究的深入发展。