SN/T 1165.1-2002《蓝舌病竞争酶联免疫吸附试验操作规程》基本信息
标准号:SN/T 1165.1-2002
中文名称:《蓝舌病竞争酶联免疫吸附试验操作规程》
发布日期:2002-11-25
实施日期:2003-05-01
发布部门:中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
起草单位:国家认证认可监督管理委员会
中国标准分类号:B41动物检疫、兽医与疫病防治
SN/T 1165.1-2002《蓝舌病竞争酶联免疫吸附试验操作规程》介绍
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局于2002年11月25日发布了《蓝舌病竞争酶联免疫吸附试验操作规程》(SN/T 1165.1-2002),并于2003年5月1日正式实施。
一、标准概述
SN/T 1165.1-2002标准规定了蓝舌病竞争酶联免疫吸附试验(cELISA)的操作规程。cELISA技术基于特异性抗体与病毒抗原之间的特异性结合原理,通过酶标记的二抗与竞争性抗体的结合,实现对病毒抗原的定性和定量检测。
二、标准适用范围
本标准适用于蓝舌病病毒的检测,包括病毒抗原的定性检测和病毒抗体的定量检测。标准适用于以下几类样本的检测:
1、反刍动物的血液样本;
2、反刍动物的组织样本;
3、反刍动物的乳汁样本;
4、蓝舌病病毒感染的细胞培养物。
三、试剂与材料
1、竞争性抗体:针对蓝舌病病毒的特异性单克隆抗体;
2、酶标记的二抗:针对竞争性抗体的酶标记多克隆抗体;
3、病毒抗原:蓝舌病病毒的纯化抗原或感染细胞培养物;
4、酶底物:用于检测酶活性的底物;
5、缓冲液:用于稀释样本、抗体和抗原的缓冲液;
6、洗涤液:用于清洗反应板的洗涤液;
7、显色剂:用于显色反应的试剂。
四、操作步骤
1、样本准备:对血液、组织、乳汁等样本进行处理,提取病毒抗原或抗体;
2、反应板包被:将病毒抗原固定在反应板的孔中;
3、样本稀释:将提取的样本进行适当稀释;
4、竞争反应:将稀释后的样本与竞争性抗体混合,加入反应板中进行竞争反应;
5、洗涤:去除未结合的样本和竞争性抗体;
6、二抗标记:加入酶标记的二抗,与竞争性抗体结合;
7、显色:加入酶底物和显色剂,进行显色反应;
8、测定:使用酶标仪测定各孔的吸光度值。
五、结果判断与报告
1、结果判断:根据吸光度值与标准曲线的关系,判断样本中病毒抗原或抗体的存在与否;
2、结果报告:将检测结果以书面形式报告给委托方或相关部门。
六、质量控制
为确保cELISA试验的准确性和可靠性,标准对质量控制提出了以下要求:
1、使用标准化的试剂和材料;
2、定期对试验操作进行验证和校准;
3、对试验结果进行统计分析,评估试验的重复性和准确性。
SN/T 1165.1-2002《蓝舌病竞争酶联免疫吸附试验操作规程》为蓝舌病的检测提供了一种准确、快速、简便的方法。通过遵循这一标准,实验室可以有效地提高蓝舌病检测的准确性和效率。标准也为相关研究人员提供了宝贵的参考,有助于推动蓝舌病研究的深入发展。
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