GB/T 27981-2011《牛传染性鼻气管炎病毒实时荧光PCR检测方法》

GB/T 27981-2011《牛传染性鼻气管炎病毒实时荧光PCR检测方法》基本信息

标准号：GB/T 27981-2011

中文名称：《牛传染性鼻气管炎病毒实时荧光PCR检测方法》

发布日期：2011-12-30    

实施日期：2012-06-01

发布部门：中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局  中国国家标准化管理委员会    

归口单位：全国动物防疫标准化技术委员会(SAC/TC 181)    

起草单位：中华人民共和国广东出入境检验检疫局、中华人民共和国江苏出入境检验检疫局

起草人：陈茹、刘中勇、林志雄、罗琼、曾碧健、许如苏、姜焱、吴晓薇    

中国标准分类号：B41动物检疫、兽医与疫病防治

国际标准分类号：11.220兽医学

GB/T 27981-2011《牛传染性鼻气管炎病毒实时荧光PCR检测方法》介绍

GB/T 27981-2011《牛传染性鼻气管炎病毒实时荧光PCR检测方法》这一国家标准，该标准由中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局和中国国家标准化管理委员会联合发布，于2011年12月30日发布，并于2012年6月1日正式实施。

一、标准概述

GB/T 27981-2011标准规定了牛传染性鼻气管炎病毒实时荧光PCR检测方法，适用于牛传染性鼻气管炎病毒的定性和定量检测。该标准旨在通过实时荧光PCR技术，快速、准确地识别和测量牛传染性鼻气管炎病毒的存在和数量，以便于及时采取防控措施。

二、检测原理

该标准基于实时荧光PCR技术，通过设计特异性引物和探针，对牛传染性鼻气管炎病毒的特定基因序列进行扩增和检测。在PCR反应过程中，随着DNA的扩增，荧光信号强度会随之增加，通过监测荧光信号的变化，可以实时监测病毒DNA的扩增情况，从而实现对病毒的定量分析。

三、样本采集与处理

标准详细规定了样本的采集、运输和处理方法。样本采集应遵循无菌操作原则，确保样本的代表性和完整性。样本采集后，应尽快进行处理或保存，以防止病毒活性的丧失。样本处理包括病毒的提取和纯化，以便于后续的PCR检测。

四、实验操作步骤

1、试剂准备：包括PCR反应体系的配制，包括引物、探针、酶和其他必要的反应成分。

2、样本制备：对采集的样本进行适当的处理，提取病毒RNA或DNA。

3、PCR扩增：将样本和试剂加入PCR反应体系中，进行实时荧光PCR扩增。

4、数据分析：通过分析荧光信号的变化，确定样本中病毒的存在和数量。

五、结果判定

标准提供了结果判定的详细指南，包括阳性、阴性和无效样本的判断标准。阳性样本表示病毒存在，阴性样本表示病毒不存在，无效样本则需要重新检测。

六、质量控制

为了确保检测结果的准确性和可靠性，标准规定了严格的质量控制措施。包括使用标准品进行校准，以及设置阳性和阴性对照，以监控实验过程中可能出现的偏差。

七、标准的意义

GB/T 27981-2011标准的实施，为牛传染性鼻气管炎病毒的检测提供了统一的技术规范，有助于提高检测的准确性和效率，对于控制和预防牛传染性鼻气管炎的传播具有重要作用。同时，该标准也促进了畜牧业的健康发展，保障了公共卫生安全。