GB/T 35909-2018《猪肺炎支原体PCR检测方法》

GB/T 35909-2018《猪肺炎支原体PCR检测方法》基本信息

标准号：GB/T 35909-2018

中文名称：《猪肺炎支原体PCR检测方法》

发布日期：2018-02-06    

实施日期：2018-09-01

发布部门：中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局  中国国家标准化管理委员会    

提出单位：中华人民共和国农业部    

归口单位：全国动物卫生标准化技术委员会(SAC/TC 181)    

起草单位：江苏省农业科学院

起草人：邵国青、冯志新、熊祺琰、刘茂军、张磊、王海燕、武昱孜、韦艳娜、刘蓓蓓、甘源、华利忠、王佳、王丽    

中国标准分类号：B41动物检疫、兽医与疫病防治

国际标准分类号：11.220兽医学

GB/T 35909-2018《猪肺炎支原体PCR检测方法》介绍

GB/T 35909-2018《猪肺炎支原体PCR检测方法》于2018年2月6日发布，并于2018年9月1日正式实施。

一、样品采集与处理

标准规定了样品的采集和处理方法。样品可以是猪的肺组织、支气管灌洗液、血液等，采集时应遵循无菌操作原则，避免交叉污染。样品处理包括样品的保存、运输和核酸提取等，要求在低温条件下进行，以保证样品中的核酸不被破坏。

二、核酸提取

核酸提取是PCR检测的关键步骤之一。标准规定了核酸提取的方法和要求，包括样品的裂解、核酸的纯化和浓度测定等。核酸提取的纯度和浓度直接影响PCR扩增的效果，因此需要严格按照标准操作。

三、PCR扩增

PCR扩增是检测猪肺炎支原体的核心步骤。标准规定了PCR扩增的条件和要求，包括引物的设计、反应体系的配制、扩增程序的设置等。引物设计需要针对猪肺炎支原体的特异性基因序列，以提高检测的特异性和灵敏度。反应体系的配制和扩增程序的设置需要根据实际情况进行优化，以获得最佳的扩增效果。

四、结果分析

PCR扩增后，需要对结果进行分析，以确定样品中是否存在猪肺炎支原体。标准规定了结果分析的方法和要求，包括凝胶电泳、核酸序列分析等。凝胶电泳可以直观地观察到PCR扩增的产物，通过比较扩增条带的大小和亮度，可以初步判断样品中是否存在猪肺炎支原体。核酸序列分析可以进一步确认扩增产物的特异性，提高检测的准确性。