DB45/T 1007-2014《猪传染性胃肠炎病毒的检测RT-PCR法》

DB45/T 1007-2014《猪传染性胃肠炎病毒的检测RT-PCR法》基本信息

标准号：DB45/T 1007-2014

中文名称：《猪传染性胃肠炎病毒的检测RT-PCR法》

发布日期：2014-05-25    

实施日期：2014-06-25

发布部门：广西壮族自治区质量技术监督局    

DB45/T 1007-2014《猪传染性胃肠炎病毒的检测RT-PCR法》介绍

广西壮族自治区质量技术监督局于2014年发布了DB45/T 1007-2014《猪传染性胃肠炎病毒的检测RT-PCR法》标准。

一、标准概述

DB45/T 1007-2014《猪传染性胃肠炎病毒的检测RT-PCR法》是一项地方性标准，旨在规范猪传染性胃肠炎病毒的检测方法，提高检测的准确性和效率。该标准规定了RT-PCR法在猪传染性胃肠炎病毒检测中的操作流程、试剂、设备、样本处理、数据分析等方面的具体要求。

二、标准主要内容

1、试剂和设备

标准规定了进行RT-PCR检测所需的试剂和设备，包括RNA提取试剂、反转录酶、DNA聚合酶、引物、核酸电泳设备等。所有试剂和设备均应符合国家相关标准和规定，确保检测结果的准确性和可靠性。

2、样本处理

样本处理是RT-PCR检测的关键步骤之一。标准规定了样本的采集、保存和提取方法。样本应从疑似感染猪的肠道或粪便中采集，采集后应立即进行RNA提取，或在-70℃以下保存。RNA提取应使用专用试剂，确保RNA的完整性和纯度。

3、反转录和PCR扩增

反转录和PCR扩增是RT-PCR检测的核心步骤。标准规定了反转录和PCR扩增的具体操作流程，包括反应体系的配制、反应条件的设置、PCR产物的检测等。同时，标准还提供了TGEV特异性引物的序列信息，以指导实验人员选择合适的引物。

4、数据分析

数据分析是评估RT-PCR检测结果的重要环节。标准规定了PCR产物的电泳分析方法，包括电泳条件的设置、条带的判断等。当PCR产物出现特异性条带时，可判断样本中存在TGEV。同时，标准还强调了数据分析的准确性和可重复性，要求实验人员严格按照标准操作。

5、质量控制

质量控制是确保RT-PCR检测准确性的关键。标准规定了实验过程中的质量控制措施，包括阳性对照、阴性对照、内参照等。同时，标准还要求实验人员定期进行实验操作的培训和考核，以提高检测水平。

三、标准的应用和意义

DB45/T 1007-2014《猪传染性胃肠炎病毒的检测RT-PCR法》标准的发布和实施，为猪传染性胃肠炎病毒的检测提供了科学、规范的方法。通过该标准的应用，可以提高检测的准确性和效率，及时发现和控制TGEV的传播，降低养殖业的损失。同时，该标准还有助于提高从业人员的检测技能和水平，推动养殖业的健康发展。