DB37/T 3673-2019《牡蛎疱疹病毒I型检测技术规范 巢式PCR法》基本信息
标准号:DB37/T 3673-2019
中文名称:《牡蛎疱疹病毒I型检测技术规范 巢式PCR法》
发布日期:2019-08-30
实施日期:2019-09-30
发布部门:山东省市场监督管理局
提出单位:山东省农业农村厅
归口单位:山东省渔业标准化技术委员会(鲁TC 03)
起草单位:山东农业大学、济宁滨阳生物科技股份有限公司、泰安益海生物科技有限公司、泰安智博生物科技有限公司、南京根洋生物科技有限公司、南京少伯生物科技有限公司、南京福海生物科技有限公司
起草人:王雪鹏、丁雷、闫现广、王方鹏、郭志明、孙永灿、付天增、姜衡、黄金菁
中国标准分类号:B41动物检疫、兽医与疫病防治
国际标准分类号:11.220兽医学
DB37/T 3673-2019《牡蛎疱疹病毒I型检测技术规范 巢式PCR法》介绍
山东省市场监督管理局于2019年8月30日发布了DB37/T 3673-2019《牡蛎疱疹病毒I型检测技术规范 巢式PCR法》(以下简称“本标准”),并自2019年9月30日起正式实施。
一、标准适用范围
本标准适用于牡蛎疱疹病毒I型的检测,特别是针对牡蛎养殖、加工和流通环节的病毒检测。通过本标准的实施,可以及时发现和控制病毒的传播,保障牡蛎产业的健康发展。
二、检测技术原理
本标准采用巢式PCR(Nested Polymerase Chain Reaction, nPCR)技术进行牡蛎疱疹病毒I型的检测。巢式PCR技术是一种高灵敏度、高特异性的分子生物学检测方法,通过两次PCR扩增,大大提高了对病毒DNA的检测灵敏度。
三、样本采集与处理
1. 样本采集:本标准规定了牡蛎样本的采集方法,要求采集新鲜的牡蛎组织,确保样本的代表性和可靠性。
2. 样本处理:对采集的样本进行适当的处理,如研磨、离心等,以便于后续的DNA提取和检测。
四、DNA提取与纯化
本标准详细规定了DNA提取和纯化的方法,包括试剂的选择、操作步骤和注意事项等。通过严格的DNA提取和纯化过程,确保后续PCR检测的准确性和重复性。
五、PCR扩增与检测
1. PCR扩增:本标准规定了巢式PCR的实验条件,包括反应体系、循环参数等,以确保PCR扩增的特异性和效率。
2. 凝胶电泳:通过凝胶电泳观察PCR产物,判断病毒DNA的存在与否。本标准对凝胶电泳的操作步骤、条件和结果判断进行了详细规定。
3. 结果分析:根据凝胶电泳的结果,结合阳性对照和阴性对照,对牡蛎样本中的病毒进行定性和定量分析。
六、质量控制
本标准强调了实验过程中的质量控制,包括试剂的质量、操作的规范性、实验环境的控制等。通过严格的质量控制,确保检测结果的准确性和可靠性。
七、标准的应用与推广
本标准的制定和实施,为牡蛎疱疹病毒I型的检测提供了科学、规范的方法。通过本标准的推广应用,可以提高牡蛎产业的整体水平,保障消费者的食品安全。
DB37/T 3673-2019《牡蛎疱疹病毒I型检测技术规范 巢式PCR法》的发布和实施,标志着山东省在牡蛎病毒检测领域迈出了重要的一步。本标准的推广应用,将对提高牡蛎产品质量、保障消费者健康、促进牡蛎产业发展产生积极的影响。
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